Антинуклеарные антитела

Антинуклеарные антитела — общее название группы разнородных антител направленных против различных компонентов клетки, выявление их ассоциировано с аутоиммунными заболеваниями, преимущественно системной красной волчанкой.

Синонимы: антиядерные антитела, антинуклеарный фактор, антиядерный фактор, антитела к экстрагируемым ядерным (нуклеарным) антигенам, antinuclear antibodies,  Hep-2 substrate, ANA-Hep2, fluorescent antinuclear antibody detection, ANA, FANA

Антинуклеарные антитела — это

большой комплекс антител (более 200), преимущественно иммуноглобулины G (реже IgМ и IgА), которые появляются в результате нарушении механизма аутотолернатности при аутоиммунных и ревматических заболеваних.

Иммунная система человека производит антитела — специальные белки, которые борются с вирусами, бактериями, грибками, различными паразитами — т.е. всем, что генетически отличается от своего. Задание любого антитела — уничтожить инородный материал, а родные клетки не трогать (механизм аутотолерантности)

В некоторых случаях иммунный ответ направлен не против инородных, а против собственных клеток и тканей. В таком случае говорят о развитии аутоиммунного заболевания. А антитела, которые вырабатываются к своим же клеткам или их компонентам называются аутоиммунными.

У большинства людей есть в крови незначительное(!) количество аутоантител, которые не являются проявлением болезни.

Только в случае серьезной поломки в иммунитете, уровень аутоантител становится повышенным и достаточным для постановки диагноза.

ANA может быть положительным еще  до появления первых симптомов. Около 95 % пациентов с системной красной волчанкой имеют антиядерные антитела. Наличие симптомов волчанки подтверждает диагноз.

Механизм образования антиядерных антител

• влияние ультрафиолетовых лучей на кожу в результате происходит активация процессов запрограммированной гибели клетки (апоптоза), что является нормальной реакцией организма, но при системных заболеваниях происходит еще и усиленная миграция лимфоцитов
• компоненты клетки, которые были ранее недоступны и невидимы для иммунной системы, такие как ядрышки, гистоны, оболочка ядра и др. «оголяются», а макрофаги, вместо того, чтоб данный материал просто «утилизировать», передают сигнал о нем по цепочке иммунного ответа
• В-лимфоциты, в ответ на сигнал макрофага, начинают вырабатывать антиядерные антитела, которые связываясь с соответствующим ангигеном образуют иммунные комплексы (ядерный антиген + антитело IgG, IgM, IgA)
• иммунные комплексы откладываются на базальной мембране различных органов и тканей, особенно сосудов, активация системы комплемента — местного воспалительного ответа
• повреждение с нарушением функции органа

Антинуклеарные антитела направлены против различных структур нормальной клетки. 

Виды антинуклеарных антител:

• anti-Ro (SS-A) — антитела к белкам связанным с РНК Y1-Y5 в сплайсосомах
• anti-Jo1 — антитела к цитоплазматическому антигену Jo-1
• anti-dsDNA — антитела к двухцепочечной ДНК
• anti-Sm
• anti-La (SS-B) — антитела к белку, связанному с РНК-полимеразой-3
• anti-Sci 70 — антитела к ядерной топоизомеразе
• anti-U1 RNP — антитела к U1 рибонуклеопротеину
• антицентромерные антитела
• антигистоновые антитела

Анализ на антинуклеарные антитела назначается

• подозрение на наличие системной красной волчанки, синдрома Шергена
• при наличии одного системного заболевания и подозрении на появление другого (например, системная красная волчанка и антифосфолипидный синдром)

При каких симптомах стоит определять антинуклеаные антитела?

• артрит — воспаление сустава, проявляться болью, отечностью, нарушением подвижности, покраснением кожи и повышением температуры над ним
• перикардит или плеврит неясного происхождения
• заболевания почек иммунного  генеза или изменения в результатах анализа мочи (протеинурия, гематурия)
• гемолитическая анемия — разрушение эритроцитов с повышением уровня билирубина в крови и моче
• тромбоцитопения — сниженное число тромбоцитов в крови
• нейтропения — сниженное число нейтрофилов в лейкоцитарной формуле
• кожные симптомы — сыпь, утолщение кожи, особенно после активного воздействия солнца
• синдром Рейно — периодическое изменение цвета пальцев стоп и кистей (бледность, посинение и покраснение) с нарушением чувствительности и болью
• атипичные неврологические и психические симптомы
• повышение температуры тела, усталость, снижение веса, увеличение лимфатических узлов

Виды исследования антинуклеарных антител

Существует два метода определения антинуклеарных антител в крови:

1. Непрямая иммунофлуоресцентная микроскопия (FANA — fluorescent antinuclear antibody test) на препарате Hep-2 клеток (клеточная линия, полученная из аденокарциномы гортани) — антинуклеарные антитела (при их наличии) связываются с антигенами клеток Hep-2, добавляют специальные светящиеся метки, присоединяющиеся к образованному комплексу и под микроскопом смотрят интенсивность и тип свечения. Лучший метод исследования антинуклеарных антител. Другое название — волчаночные тест-полоски.

Результат исследования пишут в виде титра — максимального разведения крови, при котором видно свечение, также описывается тип флуоресценции (в случае положительного результата). Чем больше антител, тем выше титр. Низкие титры считаются негативными, а высокие обозначают повышенную концентрацию антиядерных антител.

Типы флуоресценции при оценке ANA:

• гомогенный (диффузный, однородный) — при системной красной волчанке, смешанных заболеваниях соединительной ткани (MCTD)
• зернистый (гранулярный) — при системной красной волчанке, синдроме Шегрена, склеродермии, полимиозите, ревматоидном артрите и MCTD — самый неспецифический
• ядрышковый (нуклеолярный) — при склеродермии и полимиозите
• центромерный — при склеродермии и CREST синдроме
• цитоплазматический — дерматомиозит, полимиозит, аутоиммунные заболевания печени, первичный билиарный цирроз

Пример положительного результата исследования антиядерных антител: «Положительный разведение/титр1:320, гомогенная картина“.

Алгоритм действий врача после исследования антиядерных антител методом FANA

• отрицательный результат анализа на антиядерные антитела + симптомы — провести анализы: anti-Ro и anti-Jo1
• положительный результат анализа на антиядерные антитела + наличие/отсутствие симптомов — провести анализы на anti-DNA, anti-Sm, anti-Ro, антигистоновые и антицентромерные антитела, волчаночный антикоагулянт, anti-Sci-70, anti-U1 RNP, anti-Jo1 — зависит от проявлений заболевания

2. Ферментный иммунный анализ (ELISA) — антитела, присутствующие в крови, связываются с соответствующим антигеном, что приводит к изменению цвета раствора.

• менее 1.0 U — отрицательный результат (норма)
• 1.1-2,9 U — слабо положительный (требует повторения)
• 3,0-5,9 U — положительный
• более 6,0 — резко положительный

Положительный результат анализа на антинуклеарные антитела — это не диагноз, а восклицательный знак о необходимости дополнительных анализов. Требует периодического, более тщательного обследования, для максимально раннего выявления возможного заболевания.

Отрицательный результат исследования на антинуклеарные антитела указывает на их отсутствие в крови, но не исключает диагноз аутоиммунного заболевания.

Анализ на антинуклеаные антитела проводят вместе со следующими исследованиями

• общий анализ крови
• общий анализ мочи
• печеночные пробы — билирубин, АСТ, АЛТ, ГГТ, щелочная фосфатаза
• ревмопробы — С-реактивный белок, скорость оседания эритроцитов (СОЭ), ревматоидный фактор
• АЦЦП
• анализ на LE-клетки
• циркулирующие иммунные комплексы
• С3 компонент комплемента
• С4 компонент комплемента

5 фактов о антинуклеарных антителах

• анализ на антинуклерные антитела — универсальный тест для всех больных с системными заболеваниями
• применяется с 1957 года, в широкой практике — от конца 80-х лет
• при наличии грудных имплантов повышенный титр антиядерных антител обнаруживают у 5-55% пациенток

Что влияет на  результат анализа?

• лекарственные препараты — прокаинамид, фенитоин, пенициллин, гидралазин
• ОРЗ и простуда, любое острое или  хроническое инфекционное заболевание

Причины появления антинуклеарного фактора в крови

1. Системные заболевания соединительной ткани

• системная красная волчанка — 95-100%, выявление антиядерных антител определяет диагноз
• дискоидная волчанка (5-25%)
• лекарственно-индуцированная волчанка (100%)
• ревматоидный артрит (30-50%)
• ювенильный ревматоидный артрит (20-50%)
• синдром Шегрена (40-70%)
• системная склеродермия
• полимиозит и дерматомиозит (30-80%)
• смешанные заболевания соединительной ткани (синдром Шарпа) 100%
• аутоиммунный гепатит (первичный билиарный цирроз) — 100%
• антифосфолипидный синдром (40-50%)
• синдром Фелти (95-100%)
• CREST-синдром

2. Аутоимунные заболевания

• аутоимунный тиреоидит (30-50%)
• узелковый периартериит (15-25%)
• сахарный диабет
• миастения

3. Инфекционные заболевания — частота выявления антинуклеарных антител варьирует

• острая ревматическая лихорадка
• инфекционный мононуклеоз
• острый вирусный гепатит В, гепатит С
• хронический активный гепатит
• малярия
• лепра
• туберкулез

4. Опухолевые заболевания

• тимома
• опухолевые заболевания крови — острый и хронический лейкоз, лимфомы

5. Другие заболевания

• идиопатическая тромбоцитопения (30%)
• рассеянный склероз (25%)
• фибромиалгия (15-25%)
• болезнь Рейно (20-60%)
• приобретенная гемолитическая анемия
• хроническая почечная недостаточность
• цирроз печени
• интерстициальный фиброз легких
• первичный склерозирующий холангит
• диффузный фасциит с эозинофилией
• витилиго

При инфекционных, опухолевых заболеваниях появление антинуклеарных анител неустойчиво, появляются при обострении и исчезают во время ремиссии.

Антинуклеарные антитела у здоровых

• выявляются у 3-15% популяции
• чаще у женщин и лиц старше 65 лет
• с увеличением возраста титры антинуклеарных антител растут
• антинуклерные антитела представлены преимущественно иммуноглобулинами М (IgM)
• могут появится за несколько лет до первых симптомов системного заболевания

Частота выявления антинуклеарных антител в здоровой популяции

• 1:40 — 20-30%
• 1:80 — 10-12%
• 1:160 — 5%
• 1:320 — 3%