Выявление филадельфийской хромосомы

Обнаружить генную перегруппировку bcr значит подтвердить наличие филадельфийской хромосомы.

BCR расположен на длинном плече 9-й хромосомы в сегменте 22q11.
Первой типичной хромосомной перестановкой, обнаруженной в опухолевых клетках человека, была филадельфийская хромосома, характерная для хронического миелолейкоза.

Появление филадельфийской хромосомы — результат обменного перемещения двух генов, при котором происходит объединение гена тирозинкиназы ABL1 9-й хромосомы с геном BCR 22-й хромосомы. Химерный белок Bcr-Abl приводит к активации путей внутриклеточной передачи сигнала, что делает клетку нечувствительной к воздействию факторов роста и вызывает ее избыточную пролиферацию. Возникает раковое заболевание крови  — миелолейкоз.

Для выявления bcr гена филадельфийской хромосомы применяют методику ПЦР или FISH:

• Для диагностики Ph1-негативных случаев (при цитогенетике 5% пациентов с хроническим миелоцитарным лейкозом или для под­тверждения Ph1-позитивных вариантов хронического миелолейкоза.
• Для диагностики пациентов с хроническим миелолейкозом в бластном кризе или в состоянии бласттрансформации.
• Для определения хронического миелолейкоза при миелопролиферативных расстройствах со сходными морфологическими чертами.
• Для мониторинга пациентов с хроническим миелолейкозом, леченных трансплантацией костного мозга, химиотерапией или интерферонами.
• Исследование генной перегрупировки и филадельфийской хромосомы способствует определению минимальной резидуальной болезни или подтверждение полной ремиссии.
• Он проводится и с целью мониторинга для раннего определения рецидива.
• Очистка bcr-позитивных клеток от аутологического костного мозга перед инфузией.
• Положительная перегруппировка bcr-гена при острой лейкемии является плохим прогнозом, осо­бенно при острой лимфобластической лимфоме.
• Обнаружение одинаковой перегруппировки генов в лимфоцитах биоптата отдаленных от опухоли участков является доказательством метастазов.
• Также используется для диагностики других генетических расстройств, например, HbS, НbС, бета-талассемии.

Факторы, влияющие на результат исследования филадельфийской хромосомы

• Ложно-негативная полимеразная цепная реакция (ПЦР) может встречаться у Ph1-позитивных пациентов по причине терапии α-интерфероном или, что менее характерно, гидроксиуреей.
• Загрязнение материала ПЦР.

Расшифровка анализа на филадельфийскую хромосому

• Филадельфийская хромосома t (9;22) (q34 qll) (Ph1) из-за bcr-abl — изменчивого объединенного гена в хромосоме 22 — встречается в 95% ранних случаев хронической фазы миелолейкоза; сохраняется в хронической фазе в то время, когда в костном мозге и крови патологии не выявляется. Это служит причиной повышения активности тирозинкиназы, которая регулирует апоптоз и созревание (особенно препятствует STI-571 — аналоговый аденозинтрифосфат, который в настоящее время используется в терапии хронического миелолейкоза).
• Наличие филадельфийской хромосомы Ph1 влияет на ответ организма на лечение и выживаемость больного. Сохраняется в тече­ние бластной фазы, при этом в 8% случаев могут возникать дополнительные аномалии, таких как, хронические миеломоноцитарные лейкемии. Другие цитогенетические аномалии встреча­ются у трети пациентов из 5% случаев с отрицательной Ph1. Филадельфийская хромосома также выявляется у менее 30% взрослых с острым лимфолейкозом, 2% взрослых с острым миелолейкозом и у 5% детей с острым лимфолейкозом.
• Появление фила­дельфийской хромосомы при острой лейкемии является плохим прогнозом. Филадельфийская хромосома присутствует как в грануломоноцитарном, эритроидном и мегакариоцитарном рост­ках, так и в некоторых В-лимфоцитах. Если кариотипирование отрицательно, то Ph1 может быть обнаружена FISH или ОТ-ПЦР — более чувствительными методами.
• Лечение иматинибом, инги­битором тирозинкиназы, приводит к цитогенетической гематологической ремиссии в больше 75% случа­ев ранней хронической фазы и в свыше 40% случаев более поздней фазы; в 50% случаев Ph1 более не определяется, но определима путем ПЦР с обратной транскрипцией у свыше 95% пациентов.