Микрометоды искусственного оплодотворения

В последние годы благодаря быстрому совер­шенствованию микрометодов искусственного оплодотворения в лечении мужского бесплодия произошли революционные изменения.

Разра­ботку этих методов стимулировало как отсутствие надежных способов терапии большинства случаев мужского бесплодия, так и низкая эффективность обычного ЭКО в таких случаях.

Микрометоды искусственного оплодотворения предполагают «обход» многих физиологических процессов, включая капацитацию сперматозоидов . Апробация этих методов показала, что наибольшую вероятность беременности обеспечи­вают те из них, которые наиболее полно «обходят» физиологическую последовательность процесса оплодотворения.

В основе микрометода искусственного оплодо­творения лежит обычное ЭКО. Поэтому он также тре­бует адекватной стимуляции яичников, отбора зре­лых яйцеклеток из преовуляторных фолликулов и переноса оплодотворенных яйцеклеток в полость матки.

Все разновидности микрометода отличаются от обычного ЭКО необходимостью отделения яйце­клеток от клеток кумулюса и радиальных корон. Это достигается отчасти с помощью фермента гиалуронидазы, отчасти механически с помощью тонкой ми­кропипетки.

Получение свежих яйцеклеток позволя­ет надежнее идентифицировать стадию их развития (по наличию полярного тельца) и отбирать из них наиболее качественные (по консистенции и цвету цитоплазмы). Использование яйцеклеток с фрагментированным полярным тельцем, расширенным око­ложелточным пространством и аномальными вклю­чениями в цитоплазме снижает вероятность оплодо­творения и имплантации.

Прежние микрометоды искусственного оплодотворения

Поскольку считается, что самым труднопреодоли­мым препятствием для качественно неполноценных сперматозоидов служит прозрачная зона яйцеклет­ки, была разработана методика ее «просверливания». Создание небольшого отверстия в прозрачной зоне должно было облегчать оплодотворение. После добавления к таким яйцеклеткам большого количества подвижных сперматозоидов некоторые из них получали возможность просколь­знуть в отверстие, завершить акросомную реакцию в околожелточном пространстве и слиться с желточ­ной мембраной.

Со временем появилось несколько методик «свер­ления» прозрачной зоны яйцеклеток человека: с помо­щью микрокапли кислоты, протеолитических фермен­тов и, наконец, лазерного луча. Это действительно по­вышало вероятность оплодотворения, но беременность все еще возникала крайне редко. Увеличить процент имплантации удалось путем «искусственной насечки» прозрачной зоны перед переносом эмбриона.

Чтобы еще больше облегчить проникновение спер­матозоидов в околожелточное пространство, отверстие в прозрачной зоне увеличивали путем частичного ее отслоения от желточной мембраны. Для этого яйце­клетку слегка втягивали в держатель и пунктировали в косом направлении микроиголкой. Извлечение микро­иглы под прямым углом к яйцеклетке приводило к на­дрыву зоны и отслоению ее от желточной мембраны.

При субзональной инъекции сперматозоидов один или несколько сперматозоидов микропипеткой вводи­ли в околожелточное пространство между прозрачной зоной и мембраной яйцеклетки.

До появления метода ИКСИ субзональная инъекция большого числа сперма­тозоидов была самым эффективным вариантом микро­метода искусственного оплодотворения при тяжелом мужском бесплодии.

Дефектные сперматозоиды не только плохо взаимодействуют с прозрачной зоной по­сле капацитации; у них нарушена также акросомная реакция и способность слияния с желточной мембра­ной яйцеклетки. Поэтому успех был большим, когда в околожелточное пространство вводили сразу несколь­ко подвижных клеток.

Опыт показал, что у человека проникновению избыточного числа сперматозоидов препятствует не только прозрачная зона, но и желточ­ная мембрана. Поэтому полиспермия в таких случаях отмечалась весьма редко. В настоящее время методика субзональной инъекции сперматозоидов в основном уступила свое место ИКСИ.