Электрофорез белков крови

Электрофорез белков крови – вид анализа крови направленный на выявление парапротеинов.

Электрофорез белков крови это —

исследования количественых и качественных характеристик белков крови по их распределению в электрическом поле.

Из белков построены все клетки тела. Белок — сложная молекула, состоящая из более простых «кирпичиков» — аминокислот. Суммарно все белки крови называют «общий белок», в свою очередь он состоит из компонентов — альбуминов, глобулинов.

Белки могут приобретать положительный и отрицательный заряд в зависимости от кислотности среды, в которой проводится электрофорез. Движение белков зависит от величины заряда, формы и размера молекулы, ее веса, свойств среды, в которой проводится электрофорез.

Позитивно заряженные молекулы белков лучше адсорбируются, чем отрицательно заряженные, поэтому при электрофорезе белков применяются негативные заряды. Альбумин имеет наибольший отрицательный заряд, поэтому быстрее двигается к аноду.

Элекрофорез белков проводят на различных носителях:

• хроматографическая бумага
• ацетатцелюлозная бумага
• агаровый гель
• акриловый гель
• полиакриловый гель
• капиллярный электрофорез

При помощи электрофореза белки крови разделяются на 5-6 фракций – альбуминовую, альфа-1-, альфа-2-, бета- и гамма-глобулины (иногда на бета-1 и бета-2-глобулины).

Проведение электрофореза белков крови назначают

• диагностика моноклональных гаммапатий!
• при выявлении повышенного уровня общего белка в крови
• при выявлении повышенного уровня гамма-глобулинов
• при выявлении очень высокого СОЭ – более 50 мм/час
• для скрининга, диагностики и контроля лечения моноклональных гаммапатий (миеломной болезни)

Единственное показание для проведения электрофореза белков крови – выявление моноклональной гаммапатии. Сегодня врач может назначить анализ конкретного интересующего белка крови, а не электрофорез, который дает лишь пориентировочные результаты.

 Моноклональная гаммапатия наблюдается при следующих заболеваниях:

• миеломная болезнь
• асимптоматическая миелома
• моноклональная гаммапатия неустановленной этиологии
• плазмоцитома
• первичный AL амилоидоз

При миеломной болезни в крови появляется значительное количество «неправильного» белка – парапротеина или М-белка. Это «моноклональный белок», поскольку синтезируется только в клетках из одного злокачественного клона В-лимфоцитов, поскольку он весь одинаков, то его очень хорошо видно на кривой электрофореза белков. Количество парапротеина (затемнение, скачок вверх) указывает на наличие миеломы, позволяет оценить ее размеры, прогрессию, а изменения концентрации – ранний симптом обострения или ремиссии.

При каких симптомах, стоит проводить электрофорез белков крови?

• боли в костях – особенно позвоночника и таза
• сильная головная боль
• изменения в общем анализе мочи — протеинутрия
• выраженная общая слабость, усталость
• частые инфекционные заболевания

Нормы электрофореза белков крови

Название фракции белка	Относительные величины, %	Абсолютные величины, г/л
альбумин	55-69	35-44
альфа-1-глобулин	1,5-4	1-3
альфа-2-глобулин	8-13	5-8
бета-глобулин	7-15	4-10
гамма	9-18	5-12
парапротеин	не обнаружен

Помните, что у каждой лаборатории, а точнее у лабораторного оборудования и реактивов есть «свои» нормы. В бланке лабораторного исследования они идут в графе – референсные значения или норма.

Электрофорез белков крови проводят вместе со следующими исследованиями

• общий анализ крови
• общий анализ мочи
• печеночные пробы – билирубин, АСТ, АЛТ, ГГТ, щелочная фосфатаза
• почечные пробы – креатинин, мочевина, мочевая кислота
• общий белок крови, альбумин, глобулины
• иммунофиксафия белков сыворотки крови
• моноклональные иммуноглобулины
• поликлональные иммуноглобулины
• свободные легкие цепи в крови
• бета-2-микроглобулин
• альбумин в моче
• электрофорез белков мочи
• иммунофиксация белков мочи
• свободные легкие цепи в моче

3 факта о элекрофорезе белков крови

• поликлональные (нормальные) иммуноглобулины главным образом сосредоточены во фракции гамма
• моноклональные белки синтезируются одним клоном плазма­тических клеток и потому абсолютно идентичны по структуре и заряду
• при проведении электрофореза моноклональный белок будет мигрировать в виде изолированного пика, часто в гамма-зоне, но иногда может присутствовать в зонах бета-1- или бета-2-, а в редких случаях – и в зоне альфа-2-глобулинов

Что влияет на результат анализа?

• повышенный уровень билирубина
• гемолиз – разрушение эритроцитов крови

Характеристики отдельных белковых фракций на электрофоретической кривой

1. Преальбумин (транстиретин) — печеночный белок,  расположен перед альбумином, имеет короткое время полувыведения, связывает гормоны щитовидной железы, транспортный белок для витамина А (предупреждает его потерю с мочой). Количество преальбумина позволяет оценить обеспеченность белками периферических тканей. Снижен при печеночных заболеваниях и дефиците питания.

2. Альбумины — наиболее крупная фракция белков крови, хорошо виден пик. Причины снижения альбуминов подробно описаны в данной статье. Редко при врожденной мутации развивается дисальбуминемия – фракция альбумина раздваивается.

3. Альфа-1-липопротеины — слабая однородно окрашенная область между альбумином и альфа-1-глобулином.

4. Размеры зоны альфа-1-глобулина определяются уровнем альфа-1-антитрипсина, орозомукоида, альфа-1-фетопротеина, альфа-1-микроглобулина. При остром воспалении — видимое затемнение.

• альфа-1-антитрипсин — генетическая вариабельность может проявиться изменением движения белков, циррозом печени, повышением печеночных проб, при беременности — снижение
• альфа-1-фетопротеин — маркер опухолей печени и врожденной патологии в пренатальной диагностике
• при снижении скорости гломерулярной фильтрации — повышение в крови альфа-1-микроглобулина

5. Альфа-2-глобулины — на формировании данной зоны влияют альфа-2-макроглобулин, церулоплазмин, гаптоглобин, пре-бета-липопротеин. Изменения не имеют клинического значения.

6. Интерзона между альфа-2- и гамма-глобулинами — окрашивается слабо, при гемолизе возникают комплексы гемоглобин-гаптоглобин, формирующие в этой области видимую полоску.

7. Бета-1-глобулины – размер затемнения определяется количеством трансферрина, фибриногена, С-реактивного белка, гемопексина. Интенсивность коррелирует с общей железосвязывающей способностью сыворотки крови. При железодефицитной анемии и при беременности повышается синтез трансферрина и усиливается контрастность зоны

8. Интерзона между бета-1- и бета-2- глобулинами образована иммуноглобулином А (IgA). Типичную полоску формирует бета-липопротеин.

 

9. Бета-2-глобулины — сформированы С4 компонентом комплемента, повышение — при остром воспалении, снижение — образование иммунокомплексов при аутоиммунных заболеваниях.

Комплемент — 11 белков, факторы неспецифического гуморального иммунитета.

• бета-2-микроглобулин — часть HLA системы на поверхности клеток, отображает скорость деления клеток, повышение в крови — снижение скорости фильтрации в почках, лимфопролиферативные заболевания
• фибриноген — белок системы свертывания крови, расположен между бета- и гамма-глобулинами, повышен при остром воспалении, снижен при тяжелой печеночной недостаточности, диссеминированном внутрисосудистом свертывании

10. Гамма-глобулины — характеристики зоны определяются свойствами классов иммуноглобулина G (IgG). Иммуноглобулин М (IgM) расположен ближе к старту.

 

Моноклональные иммуноглобулины – выявляются только при наличии заболевания, продукт одного клона клеток из В-лимфоцитов. С возрастом выявление парапротеина растет, появляется доброкачественная гипериммуноглобулинемия без каких-либо симптомов.