Проточная цитометрия

 6959
Проточная цитометрия

Цитометрия поточная — это метод распознавания и подсчета единичных клеток, помеченных флюоресцирующими моноклональными антителами или внутриклеточными антигенами, ассоциированными с клеточным происхождением (например, Т-лимфоцитарное по сравнению с В-лимфоцитарным), клеточной функцией (наличие рецепторов цитокинов или других рецеп­торов), степенью зрелости (например, пре-В-клетки или зрелые В-клетки). Сегодня общий анализ крови делают методом проточной цитометрии.

Проточная цитометрия — метод исследования количества и качества клеток в ходе их перемещения через очень узкий капилляр.

Применение поточной цитометрии

Проточная цитометрия применяется для анализа образцов, включая перефирическую кровь, аспират костного мозга, с использованием основ­ных видов биопсии, в том числе тонкоигольной аспирационной биопсии (ТАБ), биопсии свежей ткани и всех жидкостей организма.

Проточная цитометрия в диагностике, характеристике и мониторинге злокачественных новообразований:

  • Дифференциальная диагностика лейкемии миелоидной от лимфоидной при острой и малодифференцированной формах.
  • Диагностика иммунодефицитов путем иммунофенотипирования; прогноз.
  • Диагностика пароксизмальной ночной гемоглобинурии.
  • Проточная цитометрия применяется в контроле за эффективностью терапии.
  • Определение минимальной резидуальной болезни в цереброспинальной жидкости или костном мозге.

Проточная цитометрия входит в алгоритм подсчета лимфоцитарных подтипов, например, CD4+ Т-клеток в качестве суррогатных маркеров прогрессирования ВИЧ-инфекции.

Использование анти-НbF-моноклональнх антител для определения HbF (можно определить менее 0,05% фетальных эритроцитов):

  • проточная цитометрия – более точный метод, чем мазок по Клейхауэру — Бетке для подсчета фетоматеринской кровопотери;
  • выявление увеличения доли эритроцитов, содержащих HbF (F-клетки), при гемоглобинопатии, у некоторых пациентов с миелодисплазией.

Проточная цитометрия применяется с целью:

  1. Диагностика пароксизмальной ночной гемоглобинурии, миелодисплазии и системных мастоцитозов.
  2. Диагностика содержимого ДНК (анеуплоидия) и ДНК-синтезирующей активности опухолей (опре­деление степени злокачественности, например, при раке груди).
  3. Проточная цитометрия определяет показатель апоптоза.
  4. Определение мультилекарственной устойчивости в химиотерапии рака (например, устойчивость при чрезмерной экспрессии Р-гликопротеина и других белков).
  5. Определение перекрестной гистосовместимости для трансплантации органов и стволовых клеток (при трансплантации печени в том числе).
  6. Проточная цитометрия используется для определения числа CD34+ -клеток в периферической крови или трансплантате костного мозга, что коррелирует с успехом пересадки и длительностью гематопоэтического восстановления по­сле пересадки стволовых клеток.
  7. Для определения клеточносвязанных антител и сортировки субпопуляций в их составе.
  8. Подсчет ретикулоцитов (при анемиях, гиповитаминозах, для определения регенеративной актив­ности трансплантанта костного мозга). Также метод используют для определения индекса созре­вания ретикулоцитов и фракции юных ретикулоцитов (контроль анемий). Читайте о диагностике анемии в статье «Диагностика анемии. Какие анализы стоит сдавать?».
  9. Определение человеческого лейкоцитарного антигена В27 (HLA-B27).
  10. Определение антинейтрофильных антител, связанных с гранулоцитами или расположенных сво­бодно в плазме.
  11. Исследование функции нейтрофилов при иммунодефиците (например, фагоцитоз, кислородный взрыв, иммунофенотипирование) и хронической гранулематозной болезни.
  12. Митогенстимулированная оценка Т-клеток.
  13. Определение функциональной активности тромбоцитов, например, оценка состояния и размещения наружного рецептора в диагностике врожденных функциональных расстройств тромбоцитов (gpIIb/IIIa при тромбастении Гланцманна; gplb при болезни Бернара — Сулье), показатель тромбоцитассоциированного IgG при иммунной тромбоцитопении и др.
  14. Исследование выживаемости эритроцитов с использованием эритроцитов, меченных биотином вме­сто хрома-51.
  15. Выявление внутриклеточных паразитов (Babesia, Plasmodium, Trypanosoma) с использованием РНК- и ДНК-связанных флуорохромов, которые связывают паразитов.

В трансфузионной медицине проточная цитометрия используется для:

  • Определение и подсчет низкого уровня иммуноглобулинов, связанных с эритроцитами и не опре­деляемых прямым антиглобулиновым тестом (прямая проба Кумбса) у пациентов с гемолизом.
  • Определение эритроцитарного химеризма.
  • Точное фенотипирование эритроцитов после многочисленных трансфузий.
  • Перекрестное взаимодействие с тромбоцитами.
  • Определение комбинации лейкоцитов в продуктах крови.

Цитометрия применяется при трансплантации:

  • Трансплантация стволовых клеток: соответствие числа CD34 у доноров или реципиентов.
  • Определение аллоантител к HLA при трансплантации органов.

В микробиологии цитометрия применяется для:

  • выявления специфических антител;
  • определения присутствия гетерогенных популяций с разной чувствительностью к антибиотикам.

Метод проточной цитометрии не рекомендуется для диагностики Ходжкинской лимфомы, хронического миелобластного лейкоза или миелодиспластического синдрома, но может использоваться для мониторинга последних двух патологий.

Комментарии (0)

Комментариев нет, будьте первым!

Написать комментарий