Диагностика хламидиоза

Диагноз хламидиоза можно достоверно установить применяя лабораторные методы исследования, поскольку жалобы и симптомы заболевания не специфичны, а выявленное воспаление половых органов у женщины или конъюнктивит у новорожденного могут быть вызваны множеством микроогранизмов.

Для постановки диагноза хламидиоза у беременной женщины или новорожденного при врожденном хламидиозе исследуют различный материал, полученный  из нескольких локусов:

— соскоб эпителия — уретра, цервикальний канал, конъюнктива нижнего или верхнего века, задняя стенка глотки, вульва;

— материалы биопсии  — эндометрий, фаллопиевы трубы, яичники, спайки, внутренние органы, перинатально погибшие плоды и дети;

— первая порция свободно выпущенной мочи;

— венозная кровь.

Диагностика врожденного хламидиоза проводится по отдельным алгоритмам.

Методы лабораторной диагностики хламидийной инфекции:

1. цитологический;

2. культуральный;

3. молекулярно-биологический (ПЦР);

4. иммуноферментный анализ;

5. серологические тесты – определение антител к хламидиям;

6. кожно-аллергический тест;

7. фермент-специфический метод.

А теперь более подробно про особенности методов лабораторной диагностики хламидиоза.

Цитологические методы диагностики хламидиоза

Цитологические методы диагностики хламидиоза предполагают выявления микроорганизма под микроскопом. Материалом для исследования является соскоб с уретры и цервикального канала, взятый тампоном, специальной щеточкой или ложечкой Фолькмана (бескровно). В мазках, окрашенных по Романовскому-Гимзе, находят внутриклеточно расположенные включения сине-фиолетового или фиолетово-розового цвета. Это и есть тельца хламидий. Метод эффективен в случае острой формы и малоинформативен при хроническом течении хламидиоза. Чувствительность исследования при хламидийном цервиците составляет 20-30%.

Метод культуры клеток – «выращивание» хламидий на питательных средах. Культуральный метод диагностики хламидиоза является «золотым стандартом», то есть, если данный метод обнаружил рост хламидий, то диагноз подтвержден на 100%. Метод требует дорогостоящего оборудования, технической подготовки, жестких условий транспортировки материала. Особенности культуральной диагностики хламидиоза:

— материал для анализа можно брать из разных мест, но их число ограничено;

— материал нужно транспортировать быстро в лабораторию;

— обработка пробы сложная;

— время проведения анализа – 12-72 часа;

— метод рекомендован для контроля лечения хламидиоза

Молекулярно-биологические методы диагностики хламидиоза

Молекулярно-биологические методы диагностики хламидиоза основаны на анализе последовательности нуклеотидов в ДНК или РНК. Виды молекулярно-биологических методов диагностики хламидиоза:

1. Метод ДНК-зондов:

• лигазная цепная реакция;

• полимеразная цепная реакция (ПЦР).

2. Метод иммунофлюоресценции:

• прямая модификация.

• косвенная модификация.

Появление нового молекулярного диагностического метода — полимеразная цепная реакция (ПЦР) привела к перевороту в диагностике хламидиоза, позволяя выявлять этот микроорганизм у больного при наличии в пробе всего одной хламидии. Такая чувствительность требует особого контроля за качеством реагентов, соблюдением всех тонкостей методики, где нет мелочей, учета возможностей метода, в частности влияния ингибиторов, способных мешать диагностике  инфекции даже при явной клинической картине заболевания.

Применение полимеразной цепной реакции при диагностике хламидиоза:

— материал для анализа можно брать из различных участков;

— основная роль в получении достоверного результата принадлежит правильному забору материала;

— транспортировать нужно при низкой температуре;

— определяют наличие ДНК;

— время проведения анализа 12-24 часов;

— использование в контроле лечения не нужно.

Прямая имунофлуоресценция:

— можно обследовать различные участки (половые органы, коньюнктиву);

— основная роль принадлежит правильному забору материала;

— если препарат фиксирован – условия транспортировки не имеют значения;

— время проведения анализа – около 30 минут;

— результат зависит от опыта врача;

— использование метода в контроле лечения ограничено.

Метод иммуноферментного анализа в диагностике хламидиоза

Метод иммуноферментного анализа (ИФА) – для диагностики хламидиоза применяют твердофазный ИФА на основе моноклональных антител. Результаты анализа могут быть позитивными в течение 1,5-2 месяцев после полного выздоровления.

— места забора материала ограничены из-за неспецифичности реакции;

— определяющая роль принадлежит забору материала;

— условия транспортировки материала не имеют значения;

— оценка проб упрощена;

— прочтение текста простое и объективное;

— время проведения анализа 3 часа;

— в контроле лечения метод использовать нельзя.

Серологические методы диагностики хламидийной инфекции:

• реакция связывания комплемента (РСК);

• реакция непрямой гемагглютинации (РНГА)

• реакция непрямой иммунофлюоресценции (РНИФ)

• иммуноферментный анализ

Одноразовое обследование женщины и обнаружение в сыворотке крови IgG-антител в титре 1:16 до 1:32 может свидетельствовать как о свежей хламидийной инфекции, так и о перенесенном процессе. Необходимо повторить исследование через 3-4 недели. Если оно покажет рост титров иммуноглобулинов G, то диагноз хламидиоза подтверждается.

Серологические тесты являются вспомогательными, поскольку из-за  низкого иммунного ответа у 50% больных хламидиозом антитела не обнаруживают.

Серологические методы диагностики хламидиоза широкого применения не получили, поскольку сам факт обнаружения антител к хламидиям не означает наличия у больного возбудителя во время обследования — возможно, хламидиоз был излечен в прошлом (читай Критерии излечения хламидиоза).

Кожно-аллергический тест проводят введением 0,1 мл диагностикума внутрикожно во внутреннюю поверхность предплечья. Кожно-аллергический тест к хламидиям используют как скрининговый метод для отбора больных, подозреваемых в наличии урогенитального хламидиоза.

Фермент-специфический метод. С целью выявления возбудителя хламидиоза используют экспресс-тест «Chlamyden» непосредственно на образцах, полученных во время приема.